中級(jí)主管藥師考試基礎(chǔ)知識(shí)藥分光譜分析法(1)
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中級(jí)主管藥師考試基礎(chǔ)知識(shí)藥分光譜分析法(1):
光譜分析法
一、紫外―可見(jiàn)分光光度法
(一)特點(diǎn)
靈敏度高,可達(dá)10-4g/ml~10-7g/ml;準(zhǔn)確度高,相對(duì)誤差為2%~5%;儀器價(jià)格較低廉,操作簡(jiǎn)單,易于普及;應(yīng)用廣泛,許多化合物可以,同時(shí)應(yīng)用計(jì)算分光光度法不經(jīng)分離而直接測(cè)定混合物中各組分的含量。
(二)基本原理
波長(zhǎng)200~400nm范圍稱(chēng)為紫外光區(qū),400~760nm稱(chēng)為可見(jiàn)光區(qū)。物質(zhì)吸收紫外和可見(jiàn)光區(qū)電磁波而產(chǎn)生的吸收光譜稱(chēng)為紫外-可見(jiàn)吸收光譜。
Lambert-Beer定律 A=ECL
A為吸收度,E為吸收系數(shù),C為被測(cè)物質(zhì)溶液濃度,L為光路長(zhǎng)度。吸收系數(shù)E是物質(zhì)的物理常數(shù),隨濃度C單位的不同有不同表示方法。藥品檢驗(yàn)中使用百分吸收系數(shù) ,物理意義是當(dāng)吸光物質(zhì)溶液濃度為1%(1g/100ml),液層厚度為1cm時(shí)的吸收度。
(三)可見(jiàn)-紫外分光光度計(jì)
光源-單色器-吸收池-檢測(cè)器-數(shù)據(jù)記錄和處理
1.光源:紫外光區(qū)通常采用氫燈或氘燈,可見(jiàn)光區(qū)采用鎢燈。
2.吸收池:玻璃池適用于370nm以上的可見(jiàn)光區(qū),石英池適用于紫外、可見(jiàn)光區(qū),通常僅在紫外光區(qū)使用。
(四)紫外吸收光譜與物質(zhì)結(jié)構(gòu)的關(guān)系
紫外―可見(jiàn)吸收光譜屬分子吸收光譜,是由分子的外層價(jià)電子躍遷產(chǎn)生的,也稱(chēng)電子光譜。它與原子光譜的窄吸收帶不同。每種電子能級(jí)的躍遷會(huì)伴隨若干振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)的躍遷,使分子光譜呈現(xiàn)比原子光譜復(fù)雜得多的寬帶吸收。
當(dāng)分子吸收紫外―可見(jiàn)區(qū)的輻射后,產(chǎn)生價(jià)電子躍遷。這種躍遷有三種形式:
(1)形成單鍵的σ電子躍遷。
(2)形成雙鍵的π電子躍遷。
(3)未成鍵的n電子躍遷。
(五)吸收度的測(cè)定方法
1.對(duì)溶劑的要求:能充分溶解樣品,與樣品無(wú)相互作用,揮發(fā)性小,在測(cè)定波長(zhǎng)處的吸收要符合要求。
2.空白對(duì)照實(shí)驗(yàn):將配制溶液用溶劑(空白溶液)裝入?yún)⒈瘸乩?,調(diào)節(jié)儀器,使吸收度為0,去除溶劑和容器吸收、光散射。反射的影響。
3.測(cè)定波長(zhǎng)確證:為提高測(cè)定方法靈敏度,減少測(cè)定誤差,吸收度一般在λmax處測(cè)定。
4.供試品溶液濃度:使吸收度在0.3~0.7范圍內(nèi)。
5.儀器的狹縫寬度:以減少狹縫寬度時(shí),供試品溶液吸收度不再增加為準(zhǔn)。
?2009中藥學(xué)專(zhuān)業(yè)網(wǎng)上輔導(dǎo)招生簡(jiǎn)章
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