初級檢驗技士輔導(dǎo):細(xì)菌的營養(yǎng)和生長繁殖
初級檢驗技士輔導(dǎo):細(xì)菌的營養(yǎng)和生長繁殖
(一)細(xì)菌的營養(yǎng)
1.營養(yǎng)類型:根據(jù)細(xì)菌對營養(yǎng)物質(zhì)需要的不同,將細(xì)菌分為兩大營養(yǎng)類型。
(1)自營菌:能以簡單的無機(jī)碳化物、氮化物作為碳源、氮源,合成菌體所需的大分子,其能量來自無機(jī)化合物的氧化(化學(xué)能),也可通過光合作用而獲得(光能),如固氮菌。
(2)異營菌:不能以無機(jī)碳化合物作為唯一的碳源,必須利用有機(jī)物如糖類、蛋白質(zhì)、蛋白胨和氨基酸作為碳源和氮源,僅有少數(shù)異營菌能利用無機(jī)氮化物,以合成菌體所需的大分子,其所需的能量大多從有機(jī)物質(zhì)氧化而獲得。異營菌包括腐生菌和寄生菌兩類。腐生菌以無生命的有機(jī)物質(zhì)作為營養(yǎng)物質(zhì);寄生菌寄生于活的動植物,從宿主體內(nèi)的有機(jī)物質(zhì)中獲得營養(yǎng)。所有致病菌都是異營菌。
2.營養(yǎng)物質(zhì):營養(yǎng)物質(zhì)包括水、碳源、氮源,無機(jī)鹽類和生長因子等五類。
3.營養(yǎng)機(jī)制:細(xì)菌的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜都具有半透性,只能使水分和小分子溶質(zhì)透過,而大分子蛋白質(zhì)、多糖、脂類需經(jīng)細(xì)菌的胞外酶水解成小分子物質(zhì)后,菌體才能吸收(轉(zhuǎn)運(yùn))。轉(zhuǎn)運(yùn)的方式有三類:①離子轉(zhuǎn)運(yùn);②透性酶轉(zhuǎn)運(yùn);③磷酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)。
(1)被動擴(kuò)散:細(xì)菌依靠群體表面細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的半透性來調(diào)節(jié)各種營養(yǎng)物質(zhì)的攝取。
(2)主動吸收:細(xì)菌將許多營養(yǎng)物質(zhì)以高于細(xì)胞外濃度積累在細(xì)胞內(nèi)的過程稱為主動吸收。
(3)基團(tuán)轉(zhuǎn)位:基團(tuán)轉(zhuǎn)位亦是一種需要消耗能量的運(yùn)輸營養(yǎng)的方式。它是靠胞外酶將糖類等物質(zhì)與一種耐熱蛋白(HPr)與磷酸結(jié)合,使糖類等磷酸化而運(yùn)送到菌體內(nèi),再與HPr解離。
(二)細(xì)菌生長繁殖的條件
在合適條件下,細(xì)菌從外界攝取營養(yǎng),進(jìn)行分解代謝,獲得原料和能量,同時進(jìn)行合成代謝,合成菌體所需的成分。故細(xì)菌代謝的結(jié)果,使細(xì)菌得以生長繁殖。其生長繁殖必須的基本條件有4個方面。
1.營養(yǎng)物質(zhì):細(xì)菌所需的營養(yǎng)物應(yīng)按一定的方式配比提供。充足的營養(yǎng)是細(xì)菌進(jìn)行新陳代謝的物質(zhì)基礎(chǔ),包括水分、無機(jī)鹽類、蛋白胨和糖等。對營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌還需某些生長因子。
2.合適的pH:環(huán)境的pH對細(xì)菌的增殖有很大影響,因營養(yǎng)的吸收、分解及能量的產(chǎn)生,都需要酶參與反應(yīng),而酶活性必須在一定pH和溫度下才能發(fā)揮作用。大多數(shù)細(xì)菌合適的pH為7.2~7.6.少數(shù)細(xì)菌對pH的需要明顯不同,如霍亂弧菌pH8.4~9.2,結(jié)核分枝桿菌pH6.5~6.8,乳酸桿菌pH5.5.
3.適宜的溫度:細(xì)菌的生長溫度分為最適溫度與容許溫度兩種,細(xì)菌按最適溫度的范圍分為嗜冷菌、嗜溫菌與嗜熱菌,其最適溫度依次為0℃~20℃、30℃~37℃和50℃~60℃.病原菌(人類的致病菌屬于此類)屬于嗜溫菌。最適溫度為37℃.不同細(xì)菌生長的容許溫度范圍也不一樣。
4.必要的氣體:細(xì)菌所需要的氣體主要是氧氣,有的細(xì)菌還需要C02.根據(jù)對氧的需要程度,可將細(xì)菌分為:
(1)需氧菌:必須在有氧(空氣)的情況下才能生長。
(2)微需氧菌:在5%左右的低氧壓環(huán)境中才能生長。
(3)厭氧菌:必須在無氧的環(huán)境中才能生長。
(4)兼性厭氧菌:在有氧和無氧環(huán)境中均能生長。
(三)細(xì)菌生長繁殖的方式與速度
1.細(xì)菌個體的生長繁殖:細(xì)菌一般是以二分裂方式進(jìn)行無性繁殖,個別細(xì)菌如結(jié)核分枝桿菌可以通過分枝方式繁殖。大多數(shù)細(xì)菌繁殖的速度為每20~30min分裂一次,稱為一代,而結(jié)核分枝桿菌則需要18~20h才能分裂一次,故結(jié)核患者的標(biāo)本培養(yǎng)需時較長。
2.細(xì)菌群體的生長繁殖:將許多細(xì)菌(細(xì)菌群體)接種在液體培養(yǎng)基中或瓊脂平板上進(jìn)行培養(yǎng),細(xì)菌群體就會一代一代地生長繁殖。對細(xì)菌群體數(shù)量及生長規(guī)律的了解,對工農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)衛(wèi)生都有現(xiàn)實的意義。
(1)細(xì)菌數(shù)的測定:了解細(xì)菌生長繁殖后數(shù)量的方法,常用的有兩種:①比濁法,將細(xì)菌生長的懸液,置入一特制的玻管內(nèi),在一定條件下與麥?zhǔn)蠘?biāo)準(zhǔn)管比濁(0.5號標(biāo)準(zhǔn)管內(nèi)含細(xì)菌濃度為1.5億/ml),可求得待測細(xì)菌懸液中的細(xì)菌數(shù);②測定活菌數(shù),即將待測細(xì)菌懸液,進(jìn)行適當(dāng)稀釋,傾注入瓊脂平板中,經(jīng)37℃18h培養(yǎng)后計算菌落數(shù),最后推算出細(xì)菌數(shù)(所含細(xì)菌數(shù)/ml)。
(2)細(xì)菌的生長曲線:將一定量的細(xì)菌接種于適宜韻液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),間隔不同時間取樣檢查細(xì)菌數(shù),觀察其生長規(guī)律。以生長時間為橫坐標(biāo),培養(yǎng)物中菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標(biāo),可得出一條曲線,稱為細(xì)菌的生長曲線。生長曲線分為4個時期:
1)遲緩期:是細(xì)菌進(jìn)入新環(huán)境后的適應(yīng)階段。
2)對數(shù)期:此期細(xì)菌以幾何級數(shù)增長(20→21→22→23→24→……),在生長曲線圖上,活菌數(shù)的對數(shù)呈直線上升,增長極快。此期細(xì)菌的形態(tài)、染色性、生理活性都較典型,對外界環(huán)境因素的作用較為敏感。
3)穩(wěn)定期:由于培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)消耗,毒性產(chǎn)物積聚,pH下降使細(xì)菌繁殖速度漸趨下降,細(xì)菌死亡數(shù)則逐漸上升,細(xì)菌繁殖數(shù)與死亡數(shù)大致平衡。
4)衰亡期:細(xì)菌繁殖逐漸減慢,死亡逐漸增多,死菌數(shù)超過活菌數(shù)。
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