2022主管中藥師藥理學(xué)考點(diǎn)精講：中藥有效成份的分離方法

(一)溶劑法

1.酸堿溶劑法

堿性成分：如生物堿可與無(wú)機(jī)酸成鹽溶于水，借此可與非堿性難溶于水的成分分離。

酸性成分：含羧基或酚羥基的酸性成分，難溶于酸水可與堿成鹽而溶于水。

內(nèi)酯或內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)成分：可被皂化溶于水，借此與其他難溶于水的成分分離。

(使用注意：酸性或堿性的強(qiáng)度、與被分離成分接觸的時(shí)間、加熱溫度和時(shí)間等，避免在劇烈反應(yīng)，某些化合物結(jié)構(gòu)發(fā)生變化或結(jié)構(gòu)不能恢復(fù)到原存于中藥中的狀態(tài)。)

2.溶劑分配法

原理：利用混合物中各成分在兩相溶劑中分配系數(shù)不同而達(dá)到分離的方法。

(二)沉淀法

1.專屬試劑沉淀法

雷氏銨鹽→生物堿。

膽甾醇→甾體皂苷。

明膠→鞣質(zhì)。

2.分級(jí)沉淀法

在混合組分的溶液中加入與該溶液能互溶的溶劑，改變混合組分溶液中某些成分的溶解度，使其從溶液中析出。如：

(1)含有糖類或蛋白質(zhì)的水溶液中，分次加入乙醇，使含醇量逐步增高，逐級(jí)沉淀出分子量段由大到小的蛋白質(zhì)、多糖、多肽等;

(2)在含皂苷的乙醇溶液中分次加入乙醚或乙醚-丙酮混合液可使極性有差異的皂苷逐段沉淀出來(lái)。

3.鹽析法

在混合物水溶液中加入易溶于水的無(wú)機(jī)鹽(最常用的是氯化鈉)至一定濃度或飽和狀態(tài)，使某些中藥成分在水中溶解度降低而析出，或用有機(jī)溶劑萃取出來(lái)。如從三顆針中分離小檗堿。

(三)結(jié)晶法

原理：利用混合物中各成分在溶劑中的溶解度不同達(dá)到分離的方法。

溶劑的要求：對(duì)被溶解成分的溶解度隨溫度不同應(yīng)有顯著差別;與被結(jié)晶的成分不應(yīng)產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng);沸點(diǎn)適中等。

常用于結(jié)晶的溶劑：甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸、吡啶等。(單用或混用)。

(四)膜分離法

利用天然或人工合成的高 分子膜，以外加壓力或化學(xué)位差為推動(dòng)力，對(duì)混合物溶液中的化學(xué)成分進(jìn)行分離、分級(jí)、提純和富集。

原理：利用分子大小不同進(jìn)行分離。

四大膜分離技術(shù)：反滲透、超濾、微濾、電滲析。

(五)色譜法

1.吸附色譜

原理：利用吸附劑對(duì)被分離化合物分子的吸附能力的差異，而實(shí)現(xiàn)分離的一類色譜。

常用的吸附劑包括硅膠、氧化鋁、活性炭、聚酰胺等。

色譜方式通常為薄層色譜和柱色譜。

2.凝膠過(guò)濾色譜(排阻色譜、分子篩色譜)

原理：分子篩作用。根據(jù)凝膠的孔徑和被分離化合物分子的大小不同而達(dá)到分離的目的。

常用的凝膠：葡聚糖凝膠(親水性)和羥丙基葡聚糖凝膠(親水性、親脂性)。

3.分配色譜

原理：利用被分離成分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離。

正相：流動(dòng)相的極性小于固定相極性。常用的固定相有氰基與氨基鍵合相。主要用于分離極性及中等極性的分子型物質(zhì)。

反相：流動(dòng)相的極性大于固定相極性。常用的固定相有十八烷基硅烷(ODS)或C8鍵合相。主要用于分離非極性及中等極性的各類分子型化合物。

4.大孔樹(shù)脂色譜

原理：(1)選擇性吸附;(2)分子篩性能。

大孔樹(shù)脂的色譜行為具有反相的性質(zhì)。被分離物質(zhì)的極性越大，其Rf值越大，反之Rf值越小。對(duì)洗脫劑而言，極性大的溶劑洗脫能力弱，而極性小的溶劑則洗脫能力強(qiáng)，故大孔樹(shù)脂在水中的吸附性強(qiáng)。實(shí)際工作中，常先將欲分離的混合物的水溶液通過(guò)大孔樹(shù)脂柱后，依次用水、濃度由低到高的含水甲(乙)醇溶液、甲(乙)醇洗脫，可將混合物分離成若干組分。

優(yōu)點(diǎn)：選擇性好、機(jī)械強(qiáng)度高、再生處理方便、吸附速度快等。

5.離子交換色譜

原理：基于混合物中各成分解離度差異進(jìn)行分離。

離子交換樹(shù)脂對(duì)交換化合物的能力強(qiáng)弱，主要取決于化合物解離度的大小，帶電荷的多少等因素?；衔锝怆x度大(酸性、堿性強(qiáng))易交換在樹(shù)脂上，相對(duì)來(lái)說(shuō)難洗脫。

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