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無菌操作法系指整個過程控制在無菌條件下進行的一種操作方法。該法適合一些不耐熱藥物的注射劑、眼用制劑、皮試液、海綿劑和創(chuàng)傷制劑的制備。

1.無菌操作室的滅菌　 常采用紫外線、液體和氣體滅菌法對無菌操作室環(huán)境進行滅菌。

(1)甲醛溶液加熱熏蒸法：該方法的滅菌較徹底，是常用的方法之一。

(2)紫外線滅菌：是無菌室滅菌的常規(guī)方法，該方法應(yīng)用于間歇和連續(xù)操作過程中。

(3)液體滅菌：是無菌室較常用的輔助滅菌方法，用于無菌室的空間、墻壁、地面、用具等方面的滅菌。

2.無菌操作 　無菌操作室、層流潔凈工作臺和無菌操作柜是無菌操作的主要場所。

3.滅菌參數(shù)(F值和 F0值)　 F與F0值即可作為驗證滅菌可靠性的參數(shù)。

(1)D值：在一定溫度下，殺滅90%微生物(或殘存率為10%)所需的滅菌時間。D值隨微生物的種類、環(huán)境和滅菌溫度變化而異。

(2)Z值：降低一個lgD值所需升高的溫度，即滅菌時間減少到原來的1/10所需升高的溫度或在相同滅菌時間內(nèi)，殺滅99%的微生物所需提高的溫度。

(3)F值：在一定滅菌溫度(T)下給定的Z值所產(chǎn)生的滅菌效果與在參比溫度(T0)下給定的Z值所產(chǎn)生的滅菌效果相同時所相當(dāng)?shù)臅r間。

(4)F0 值：在一定滅菌溫度(T)、Z值為10℃所產(chǎn)生的滅菌效果與121℃、Z值為10℃所產(chǎn)生的滅菌效果相同時所相當(dāng)?shù)臅r間(min)。鑒于F0值體現(xiàn)了滅菌溫度與時間對滅菌效果的統(tǒng)一，該數(shù)值更為精確、實用。

影響F0值的因素主要有：①容器大小、形狀及熱穿透性等;②滅菌產(chǎn)品溶液性質(zhì)、充填量等;③容器在滅菌器內(nèi)的數(shù)量及分布等。該項因素在生產(chǎn)過程中影響最大，故必須注意滅菌器內(nèi)各層、四角、中間位置熱分布是否均勻，并根據(jù)實際測定數(shù)據(jù)，進行合理排布。

計算、設(shè)置F0值時，應(yīng)適當(dāng)考慮增加安全系數(shù)，一般增加理論值的50%，即規(guī)定F0值為8分鐘，實際操作應(yīng)控制在12分鐘。

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